凍干（冷凍干燥）是通過低溫凍結、真空升華去除樣品中水分的技術，廣泛應用于生物樣本保存、藥物研發(fā)及食品工業(yè)等領域。規(guī)范操作是保障凍干效果與設備安全的關鍵，以下為從樣品制備到凍干完成的全流程指南。

　　一、前期準備：設備與環(huán)境檢查

　　操作前需確保實驗室凍干機狀態(tài)正常。首先檢查主機、真空泵、冷阱、冷凝器是否清潔無雜物；確認電源穩(wěn)定，真空管路連接緊密無泄漏；查看冷阱溫度預冷至-50℃以下（具體依機型調整），真空泵油位在標線范圍內。同時，清理操作臺面，備好防護手套、護目鏡及樣品容器（如西林瓶、培養(yǎng)皿），避免交叉污染。

　　二、樣品制備：預處理決定凍干質量

　　樣品質量是凍干成功的基礎，需注意三點：

　　1.濃度與體積：液體樣品建議濃度5%-20%（過高易形成硬殼阻礙升華），單次裝載量不超過托盤容量的70%，預留升華空間；固體樣品需粉碎至均勻顆粒（粒徑≤5mm），避免堆積過厚。

　　2.防溢與固定：液體樣品需用封口膜輕蓋容器（留微小透氣孔），防止真空抽吸時液體沸騰溢出；若使用西林瓶，需旋緊膠塞但保留約1mm縫隙，避免全密封導致內部壓力驟增。

　　3.特殊樣品處理：含表面活性劑或易氧化成分的樣品，可添加保護劑（如10%蔗糖）；微生物樣本需先離心收集菌體并懸浮于緩沖液，減少代謝干擾。

　　三、裝樣與上機：均勻擺放與參數(shù)設定

　　將預處理后的樣品均勻放置于凍干托盤，避免堆疊或貼壁（影響熱量傳遞）。關閉凍干倉門，啟動程序前需根據(jù)樣品特性設置關鍵參數(shù)：

　　?預凍階段：若樣品未提前凍結，需先開啟預凍功能（-40℃至-80℃，維持2-4小時），確保樣品凍結成固態(tài)（可通過觀察窗確認無液態(tài)殘留）；已預凍的樣品可直接進入主干燥。

　　?主干燥（升華階段）：設定冷阱溫度-60℃至-80℃，真空度10-30Pa（過高易導致樣品熔化，過低延長周期）。此階段持續(xù)至樣品重量不再明顯下降（約占總時間的60%-70%）。

　　?解析干燥（去結合水）：緩慢升溫至20-40℃（依樣品熱穩(wěn)定性調整），維持真空度，直至樣品殘余水分≤5%（可通過稱重法監(jiān)測）。

　　四、凍干過程監(jiān)控與應急處理

　　運行中需定時觀察：①真空度是否穩(wěn)定（波動＞5Pa需檢查密封性）；②冷阱結霜厚度（超過2/3需暫停除霜）；③樣品外觀（若出現(xiàn)塌陷、鼓泡，可能是預凍不充分或真空度驟變，需立即降低升溫速率）。若遇停電，保持倉門關閉，待恢復后重新抽真空；若真空泵異常，先關閉主機再排查故障。

　　五、凍干完成與后續(xù)處理

　　當系統(tǒng)提示“干燥完成”，先緩慢泄壓（避免氣流沖擊樣品），取出托盤。樣品需在干燥器內冷卻至室溫后密封（可充氮或加干燥劑），標注名稱、日期及凍干條件。最后清潔凍干倉與托盤（用75%乙醇擦拭），排空冷阱霜層，關閉總電源，完成全流程。

　　規(guī)范操作不僅能提升凍干效率，更能保障樣品活性與數(shù)據(jù)可靠性。實踐中需結合具體機型說明書靈活調整參數(shù)，積累經驗以優(yōu)化流程。